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幾種常見的PCR儀的區別及保養

儀器網小編2020-11-17 15:52:02

PCR儀作為分子生物學相關實驗的常規儀器,每年都有數千臺的選購量,但是如何選擇PCR儀,相信大***在選擇時還有***些困惑。PCR儀作為***種精密儀器,平時應該怎么保養?下面給大***講解***下

常見幾種PCR儀分類
普通PCR儀
***般把***次PCR擴增只能運行***個特定退火溫度的PCR儀,稱之為普通PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運行。主要是用作簡單的,對目的基因退火溫度的擴增。
主要應用于科研、教學、臨床醫學、檢驗、檢疫等。


梯度PCR儀
***次性PCR擴增可以設置***系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因為被擴增的不同的DNApian段其***適合的退火溫度不同,通過設置***系列的梯度退火溫度進行擴增,從而***次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的***適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣既節約時間,也節約經費。在不設置梯度的情況下亦可當做普通的PCR用。正真的梯度,是每***排管都有精確的加熱控溫探頭,其他的都是從兩頭的熱傳遞來設計控溫。
梯度PCR儀多應用于科研、教學機構。

梯度PCR儀

熒光定量PCR儀
在普通PCR儀設計基礎上增加熒光信號激發和采集系統和計算機分析處理系統,形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同,在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統,得出量化的實時結果輸出。
熒光定量PCR儀有單通道,雙通道和多通道之分。當只用***種熒光探針標記的時候,選用單通道;有多種熒光標記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產物,因為***次只能檢測***種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,實現***次檢測多種目的基因的功能。
實時熒光定量PCR儀主要應用于臨床醫學檢測、生物醫藥研發、食品行業、科研院校等。

熒光定量pcr儀

在PCR儀的維護保養中,需要注意以下問題:

1.PCR儀器需要定期檢測,視制冷方式而定***般半年至少***次。
2.PCR反應的要求溫度與實際分布的反應溫度是不***致的,當檢測發現各孔平均溫度差偏離設置溫度大于1——2℃時,可以運用溫度修正法糾正PCR實際反應溫度差。
3.PCR反應過程的關鍵是升、降溫過程的時間控制,要求越短越好,當PCR儀的降溫過程超過60s,就應該檢查儀器的制冷系統,對風冷制冷的PCR儀要較徹底地清理反應底座的灰塵;對其他制冷系統應檢查相關的制冷部件。
4.***般情況如能采用溫度修正法糾正儀器的溫度時,不要輕易打開或調整儀器的電子控制部件,必要時要請專業人員修理或利用儀器電子線路詳細圖紙進行維修。


(來源: 儀器網小編)


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