人-鼠嵌合抗體：利用DNA重組技術(shù)將鼠源單抗的輕鏈、重鏈可變區(qū)插入含有人抗體恒定區(qū)的表達(dá)載體中，轉(zhuǎn)化哺乳動物細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)所產(chǎn)生的單克隆抗體。人-鼠嵌合抗體的人源化程度可達(dá)到70%，完整的保留了鼠源單抗的可變區(qū)及親本活性，人抗體恒定區(qū)的引入則降低了免疫原性。

人鼠嵌合抗體基本原理是從分泌某種鼠單抗的雜交瘤細(xì)胞基因組中分離并鑒定出重排的功能性鼠VL（輕鏈可變區(qū)）和VH（重鏈可變區(qū)），經(jīng)過基因重組分別與人的CL（輕鏈恒定區(qū)）和CH（重鏈恒定區(qū)）區(qū)基因按照***定的方式相拼接，克隆到表達(dá)載體中構(gòu)建鼠/人輕重鏈基因表達(dá)載體，并轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞表達(dá)來制備特異性嵌合抗體。

對于其他類型的人源化抗體，其優(yōu)勢在于，技術(shù)路線簡單，易于操作；抗體完整性好，在體內(nèi)滯留時間長；鼠源抗體的親和力和特異性都得到保留，在臨床上得到了良好的反應(yīng)。

構(gòu)建人鼠嵌合抗體主要包括：克隆鼠抗體可變區(qū)基因，釣取人抗體恒定區(qū)基因，拼接鼠抗體可變區(qū)基因與人抗體恒定區(qū)基因以及構(gòu)建載體和宿主細(xì)胞。

人鼠嵌合型單克隆抗體制備優(yōu)點(diǎn)：

①不僅保留了親本鼠抗體的高特異性和親和力，而且使鼠源性成分減少 70%左右；

②其人源Fc 段能有效介導(dǎo)生物學(xué)效應(yīng)功能，如抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（Antibody dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）、補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒作用（Complement dependent cytotoxicity，CDC）等；

③能自由地選擇抗體的型、亞型、類、亞類、大小、結(jié)構(gòu)域及添加糖基化位點(diǎn)等，以利用其不同的生物學(xué)特點(diǎn)及理化特性；

④由高效真核表達(dá)載體和人抗體恒定區(qū)組成的嵌合抗體表達(dá)“盒子”可以容許插入不同的鼠單克隆抗體的可變區(qū)，縮短操作和研制周期；

⑤操作相對簡單。

嵌合抗體主要有三種類型：

1、嵌合IgG抗體

目前嵌合抗體的研究主要集中在嵌合IgG（Immunoglobulin G）抗體。其構(gòu)建基本原理是從生產(chǎn)某種鼠源單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞中得到目的抗體V區(qū)（variable region）基因，再與人類的C區(qū)（constant region）基因重組并克隆到合適載體中，然后轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞表達(dá)（如圖1）。

在構(gòu)建嵌合抗體時應(yīng)根據(jù)不同目的選擇不同的C片段。這是因?yàn)椴煌愋偷娜丝贵wC區(qū)與補(bǔ)體和Fc（fragment crystallizable,Fc）相互作用的能力以及引發(fā)細(xì)胞溶解的功能不盡相同。在體內(nèi)免疫系統(tǒng)中，抗體的Fc段和效應(yīng)細(xì)胞相互作用，發(fā)揮特異的生物學(xué)功能。例如IgE（Immunoglobulin E）可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)等，IgM活化補(bǔ)體的能力強(qiáng)，IgG1的補(bǔ)體活化能力比IgG3強(qiáng)，且在ADCC作用（antibody dependent cell mediated cytotoxicity）觸發(fā)能力上也比IgG3強(qiáng)。在與Fc受體的結(jié)合能力上IgG1和IgG3比較強(qiáng)，IgG4次之，而IgG2幾乎檢測不到。

2、嵌合Fab和F(ab')2抗體

嵌合Fab（antigen-binding fragment, Fab）和F(ab')2（具有兩個抗原結(jié)合表位的片段）抗體的優(yōu)勢就是滲透力強(qiáng)。Fab嵌合抗體制備原理為：將功能性抗體L,H鏈的V區(qū)基因與人的輕鏈k和H鏈CH1進(jìn)行重組，克隆到表達(dá)載體中，在轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞表達(dá)。不過對于大多數(shù)該類型的抗體來說，由于親和力較低，分子量小，容易被腎小球過濾而從血液中消失，因此大多數(shù)不適合單獨(dú)使用于臨床治-療。

(文章來源于儀器網(wǎng))